怎样通过茎尖培养法获得果树无病毒母本树？

怎样通过茎尖培养法获得果树无病毒母本树？病毒侵入果树后，一般是全身扩展，但茎尖一般不受病毒感染。因为，切下带有1~2个叶原基的茎尖进行培养，便可获得无毒个体。以苹果为例，介绍具体步骤如下：（1）培养基配制：苹果茎尖接种培养基和繁殖培养基采用MS+GA30.1~0.5PPM+IBA（或IAA）0.2~0.5PPM+BA0.5~1.0PPM+蔗糖30G/L+琼脂5~7.5G/L，PH值5.8。生根培养基采用1/2MS+IAA1.5PPM+蔗糖20G/L、琼脂5~7.5G/L，PH值5.8。用部分灭菌水将各种化合物溶解，然后加入琼脂，加热溶化，最后以灭菌水定容，调节PH值，倒入培养器皿中。然后在1.1千克/平方厘米下消毒15分钟，备用。（2）切取茎尖：于春、夏取田间嫩梢，用70%酒精消毒30秒，再用10%漂白粉或0.1%升汞液消毒10~15分钟，灭菌水冲洗3~5次。把芽鳞片剥除，切下茎尖长0.1~0.2毫米。（3）培养及增殖：把0.1~0.2毫米的茎尖接种于培养基上，在温度28~30度、光强1500~2000勒克斯、光照每天10小时左右的条件下培养。为了增殖，在无菌条件下切取茎尖产生的侧芽，接种到增殖培养基上。增殖系数一般为每30~40天达1：4~1：6。（4）诱导生根与移植：增殖繁殖得到的芽或新梢，移置到生根培养基中，经诱导生根培养，便可以得到完整的试管苗。待根长2~3厘米时，敞开培养器皿口，驯化2~3天后，切下带根小苗，洗去培养基，移植于腐殖土与砂（1：1）混合的基质中，最后移植到大田中。（5）病毒检测：茎尖培养获得的个体长成后同样要进行严格的病毒检测，确认无毒者，作为无病毒原原种母本树保存和利用，带毒者淘汰。梨、葡萄和核果类果树与苹果茎尖培养的不同之处，是培养基的配方不同。